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L'analyse FISH : un caryotype moléculaire |
Zoom-technique
Les anomalies chromosomiques représentent une cause importante de mortalité et de morbidité chez l'homme. Depuis la réalisation du premier caryotype humain en 1956, cette technique de cytogénétique cellulaire permet l'identification d'anomalies portant sur le nombre (trisomie ou monosomie) ou la structure (translocation, inversion, délétion) des chromosomes.
Cependant, cette technique présente quelques limitations :
- le délai d’obtention du résultat est de 2 à 3 semaines, car elle nécessite la culture des cellules avant l’établissement du caryotype
- les cellules étudiées sont nécessairement au stade métaphasique pour l'obtention des chromosomes
- elle ne permet pas la détection des microdélétions dont la taille est inférieure à 5 millions de paires de bases.
Actuellement, grâce à une nouvelle technique de cytogénétique moléculaire, il est possible d’obtenir en quelques jours un dépistage des trisomies les plus fréquentes, en particulier la trisomie 21.
L’analyse FISH (Fluorescent In Situ Hybridization) : l'hybridation in situ fluorescente ne nécessite pas de culture cellulaire et s’applique directement aux cellules interphasiques ou métaphasiques contenues dans un frottis cellulaire. Elle permet également d'effectuer l'étude chromosomique des spermatozoïdes et de rechercher les anomalies éventuelles avant une fécondation in vitro.
Elle nécessite cependant la préparation de courtes séquences d'ADN simple brin marquées avec des molécules fluorescentes, appelées sondes, qui sont complémentaires des séquences d'ADN que l'on souhaite visualiser.
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Les étapes de la technique FISH
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Analyse FISH d'ADN normal interphasique : marquage des chromosomes 13 (vert) et 21 (rouge).
Source : cytogenetic information
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Analyse FISH d'ADN interphasique avec trisomie 21 |
Sources
http://members.aol.com/chrominfo/fishinfo.htm
http://college-genetique.igh.cnrs.fr/Enseignement/genchrom/cytomol.html
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Mise à jour le Lundi, 01 Juin 2009 09:09 |
